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      赤芍野生品與栽培品4種化學成分含量的比較

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      點擊次數:2312 更新時間:2015年12月08日14:04:43 打印此頁 關閉

      [摘要] 目的: 對中藥赤芍的不同產地野生品及栽培品中芍藥苷、沒食子酸、兒茶素及苯甲酸含量進行比較研究。方法:采用高效液相色譜法,色譜柱為 Agilent Zorbax C18( 4. 6 mm × 250 mm,5 μm) ,以乙腈-0. 02% 磷酸水溶液為流動相梯度洗脫,檢測波長 230 nm( 兒茶素、苯甲酸) ,272 nm( 沒食子酸、芍藥苷) ,柱溫 30 ℃ ,進樣量 10 μL。結果: 赤芍野生品中沒食子酸、兒茶素、芍藥苷、苯甲酸的含量范圍依次為 0. 008 35% ~ 0. 143% ,0. 024 2% ~ 0. 675% ,2. 23% ~ 8. 03% ,0. 033 2% ~ 0. 152% 。赤芍栽培品以上 4 種 化 學 成 分 的 含 量 范 圍 分 別 為 0. 006 26% ~ 0. 052 3% ,0. 114% ~ 0. 516% ,1. 57% ~ 4. 18% ,0. 032 5% ~0. 115 % 。

       黑龍江大慶和吉林梨樹縣產赤芍栽培品的芍藥苷 、兒茶素含量與野生品的沒有顯著性差異 。 結論 建議以芍藥苷及兒茶素共同做為評判赤芍道地藥材質量的指標性成分黑龍江省和吉林省為適宜進行赤芍栽培的地域。A,B,C,檢測波長分別為 272 ,230 ,272 ,230 nm1. 沒食子酸 ; 2. 兒茶素 ; 3. 芍藥苷 ; 4. 苯甲酸圖 對照品( A,B) 與赤芍供試品( C,D) 色譜甲 酸 的 質 量 分 數 分 別 為 0. 044 7% ,0. 210% ,3. 88 % ,0. 049 3 % ; RSD 分 別 為 1. 4 % ,0. 6 % ,1. 0 % ,1. 2 % 。2. 7 穩定性試驗 取同一 2. 2 項下供試品溶液,室溫下放置,分別于 0,2,4,6,8,24 h 在上述色譜條件下進樣分析,計算沒食子酸、兒茶素、芍藥苷和苯甲酸 峰 面 積 的 RSD 分 別 為 1. 7% ,0. 2% ,0. 3% ,1. 2 % ,表明供試品溶液在 24 h 內基本穩定 。2. 8 回收率試驗 取已知含量赤芍藥材粉末 份,每份 0. 25 g,精密稱定,分別加入混合對照品溶液適量,按 2. 2 項下方法制備成供試品溶液,在上述色譜條件下進樣分析,計算回收率,結果見表 1。2. 9 樣品測定 取所收集的不同產地赤芍野生品與栽培品藥材,按 2. 2 項下方法制備成供試品溶液,在上述色譜條件下進樣分析,按外標一點法計算上述 種成分的百分含量,結果見表 2。結果顯示,赤芍野生品沒食子酸、兒茶素、芍藥苷、苯 甲 酸 質 量 分 數 范 圍 分 別 為 0. 008 35% 0. 143 % ,0. 024 2 % ~ 0. 675 % ,2. 23 % ~ 8. 03 % ,0. 033 2 % ~ 0. 152 % ,赤 芍 栽培品 種化學成分的含量范圍分別為0. 006 26% ~ 0. 052 3% ,0. 1145 0. 516 % ,1. 57 % ~ 4. 18 % ,0. 032 5 % ~ 0. 115 % 。

      以黑龍江大慶和吉林梨樹縣產赤芍栽培品的 種化學成分含量與赤芍野生品的含量進行 檢驗,除沒食子酸 的 含 量 外,其 他 成 分 含 量 兩 者 沒 有 顯 著 性差異。討論從結果可知,道地藥材多倫赤芍的主要成分芍藥苷質量分數不是最高的,而處在一個中等偏上的位置,為 3. 65% ~ 5. 47% ; 兒茶素的質量分數亦然,為 0. 126% ~ 0. 421% 。曾 經 提 出 將 兒 茶素作為赤芍 藥 材質量的化學 評 價 指 標 之 一。鑒 于此,建議將芍藥苷、兒茶素共同作為赤芍優質的道地藥材質量的化學評價指標。實驗樣品中兒茶素含量表現出一定的地域性。有 份樣品未檢出兒茶素,分別為山西柯嵐和安徽臨泉樣品。這兩處的 地理位 置 偏南,在北緯 39° 以下。有 個兒茶素相對偏低地域,質量分數為 0. 0242 % ~ 0. 117 % 。 這 個地域分別為 一為內蒙古呼倫貝爾市中部地區,包括海拉爾、鄂倫春、牙克石等地樣品二為內蒙古興安盟南部,包括科右前旗、突泉縣樣品。有關赤芍兒茶素含量地域性問題,有待進一步研究。赤芍栽培品樣品中黑龍江大慶和安徽臨泉栽培赤芍的材料為種苗,采自內蒙古海拉爾地區,吉林等赤芍野生品與栽培品 種化學成分含量的比較赤芍為活血化瘀、清熱涼血、散瘀止痛功效的常用中 藥,來 源 為 毛 茛 科 植 物 芍 藥 Paeonia lactifloraPall. 野生種群的根 。 長久以來市場流通的赤芍均為野生品,并以內蒙古多倫縣出產赤芍為道地藥材,稱“多倫赤芍”。隨著近年來臨 床需求量的不斷加大及赤芍資源的緊缺,在內蒙古、黑龍江、吉林、安徽等地出現了野生芍藥的試驗性栽培,即以野生芍藥的種子或芽頭在大田或果林下人工種植。道地藥材“多倫赤芍”與其他產地赤芍在化學成分方面的差異以及與赤芍栽培品成分的差異,是赤芍藥材質量控制和資源利用中值得關注的問題。赤芍試驗性栽培引來的問題,與其同物種 P. lactiflora 的傳統藥用栽培品,是功效完全不同的另一種常用中藥白芍,赤芍的栽培是否會引起藥性的改變,是另一值得關注的問題。赤芍化學成分主要有芍藥苷( paeoniflorin) 、芍藥內酯苷( albiflorin) 等單萜類化合物,尚含有酚類、黃酮類、鞣質類等成分。對于赤芍中芍藥苷的含量測定,以及同時測定 ~ 種成分的研究已有一些報道,但對赤芍不同產地野生品、栽培品多個成分含量同時比較的報道較少。本文選取大量多倫產和其他地區產的赤芍野生品及赤芍的栽培品,進行沒食子酸、兒茶素、芍藥苷和苯甲酸 種成分含量的比較研究,探討道地藥材的質量標準,以及赤芍栽培品的品質和質量問題。以期為制訂赤芍道地藥材的質量標準,指導中藥赤芍在適當區域的栽培提供理論依據。儀器與試藥島津 LC-20A 液相色譜儀,二極管陣列檢測器,LC solution 工 作 站 。Agilent Zorbax C18色 譜 柱 ( 4. 6mm × 250 mm,μm ) ,舒美 KQ-3200 E 型超聲清洗器昆山市超聲儀器有限公司。芍藥苷批號 1287-0902212) 購于中藥固體制劑制 造 技 術 國 家 工 程 研 究 中 心,沒 食 子 酸 批 號110831 -200302 ) 、兒茶素 批號 877 -200001 ) 、苯甲酸批號 100419-200301) 均購于中國藥品生物制品檢定所。甲醇 色 譜純、乙腈 色 譜純、磷 酸 分 析純、色譜分析用水。赤芍藥材分別購買或采集于內蒙古、河北、黑龍江、遼寧和吉林等省區,共 32 份樣品赤芍栽培品采自吉林梨樹縣、黑龍江大慶市和安徽臨泉縣,共 份樣品。吉林梨樹縣赤芍栽培樣品,為當地野生芍藥種子播種或用根莖栽種的生長不同年限樣品。黑龍江大慶市和安徽臨泉縣赤芍栽培樣品,為內蒙古海拉爾地區采挖的野生芍藥根莖栽種的生長不同年限樣品。均自然干燥。所有樣品經中國中醫科學院馮學鋒研究員及北京中醫藥大學劉春生教授鑒定,均為毛茛科植物芍藥 P. lactiflora 的干燥根。方法與結果2. 1 混合對照品溶液的制備 精密稱取對照品適量,加 50% 甲 醇 溶 解 制 成 含 沒 食 子 酸 9. 608 mg·L- 1,兒茶素 46. 28 mg·L- 1,芍藥苷 882. 2 mg·L- 1,苯甲酸 8. 856 mg·L- 1的混合對照品溶液。2. 2 供試品溶液的制備 取赤芍藥材粉末 ( 60 目 )0. 5 g,精密稱定 ,加入 50 % 甲醇 25 m L,稱重 ,超聲處理( 150 W,40 Hz) 15 min。放冷,稱重,原溶液補足減失的質量,搖勻,離心( 8 000 r·min- 1,5 min) ,取上清液過微孔濾膜,取續濾液,即得。2. 3 色 譜 條 件 Agilent Zorbax C18色 譜 柱( 4. 6 mm × 250 mm,μm) ,流動相乙腈-0. 02% 磷酸水溶液,梯 度 洗 脫 ( 0 ~ 28 min,∶ 95 ~ 8. 5 ∶ 91. 5;28 ~ 64 min,8. 5 ∶ 91. 5 ~ 17. 5 ∶ 82. 5 ) ,流速 1. 0 m L·min- 1,檢測波長兒茶素、苯甲酸為 230 nm,沒食子酸、芍藥苷為 272 nm,柱溫 30 ℃ ,進樣量 10 μL。在該條件下 成分分離良好,經二極管陣列檢測器檢驗,純度均合格。見圖 1。2. 4 線性關系的考察 精密吸取系列濃度的混合對照品溶液,在上述色譜條件下進樣分析,以峰面積為縱坐標,進樣量μg) 為橫坐標,繪制標準曲線,得沒食子酸、兒茶素、芍藥苷和苯甲酸的標準曲線和相關系數分別為 Y沒食子酸= 3. 067 × 106X - 3. 334 × 103( r = 0. 999 9) ; Y兒茶素= 2. 682 × 106X - 8. 970 × 103( r = 0. 999 9) ; Y芍藥苷= 7. 868 × 104X - 2. 571 × 104( r = 0. 999 8) ; Y苯甲酸= 4. 947 × 106X - 1. 612 × 104( r= 0. 999 9 ) 。 各成分的線性范圍分別為 0. 004 8 0. 72 ,0. 022 ~ 3. 3 ,0. 34 ~ 26 ,0. 021 ~ 3. 2 μg。 標準曲線均過原點,以外標一點法計算含量。2. 5 精密度試驗 精密量取 2. 2 項下的供試品溶液 10 μL,連續進樣 次,沒食子酸、兒茶素、芍藥苷和 苯 甲 酸 峰 面 積 的 RSD 分 別 為 0. 5% ,0. 2% ,0. 1 % ,0. 8 % 。2. 6 重復性試驗 精密稱取同一赤芍藥材粉末,按2. 2 項下方法制備 份供試品溶液,在上述色譜條件下進樣分析,結果沒食子酸、兒茶素、芍藥苷和苯

      6樹縣繁殖材料的種子為當地采集。黑龍江大慶和吉林梨樹縣赤芍栽培品中芍 藥苷質量分數 1. 57% 4. 18 % ,兒茶素質量分數 0. 114 % ~ 0. 516 % ,沒食子酸的質量分數為0. 006 26% ~ 0. 052 3% ,苯甲酸的質量分數 范 圍 為0. 032 5% ~ 0. 115% ,除 沒 食 子 酸外,栽培品與野生品沒有顯著性差異,可以認為這些地區是適宜進行赤芍栽培的地域。安徽臨泉赤芍栽培品表現出特殊性,其芍藥 苷質量分數 1. 57% ,未達到藥典規定的 1. 8%; 兒茶素未檢出,說明在該地種植的芍藥不可以做為中藥赤芍藥用

      表二.png。

      吉林梨樹縣栽培赤芍以第 年的芍藥苷含量為最高,而兒茶素的含量則呈現出隨栽培年限的增長而增加的趨勢 不包括芽頭栽培赤芍。有關赤芍栽培方式、栽培年限與藥效成分的關系有待進一步研究??疾炝?甲 醇、75% 甲 醇、50% 甲 醇、25% 甲 醇、10 % 甲醇和水 種提取溶劑 ,結果采用 50 % 甲醇為提取溶劑時,兒茶素和芍藥苷含量最高。同時發現,提取溶劑中水含量越高,芍藥苷越容易水解,從而導致苯甲酸含量上升同樣提取溶劑中水含量越高,芍藥根中的鞣質越易水解,從而導致沒食子酸含量上升。由于不宜測定水解產物,因此確定采用 50% 甲醇為提取溶劑。而后,考察了提取方法和提取時間,結果發現采用回流和超聲時間較長的方法提取時,同樣會造成水解,因此采用超聲 15 min。而在提取濃度的考察試驗中,發現提取濃度對含量沒有顯著的影響。最終確定了本文中的供試品制備方法

      上一條:赤芍的研究進展 下一條:中國藥用芍藥栽培品種
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